AEEA monomeerist dimeeriks

Ravimite ja antikehade suhe (DAR) on antikehade konjugeeritud ravimite (ADC) peamine kvaliteedinäitaja, mis mõjutab otseselt efektiivsust ja toksilisust. Ideaalne DAR on tavaliselt 2-4, kuid paljudel tõhusatel koormustel, nagu MMAE ja DM1, on tugev hüdrofoobsus. Lühikese ahelaga või üksikute PEG linkerite kasutamisel põhjustab DAR, mis ületab 4, antikehade agregatsiooni ja kliirensi kiirenemist. AEEA-AEEA kasutuselevõtt pakub sellele probleemile tõhusa lahenduse.
Võrreldes ühe AEEA linkeriga,AEEA-AEEAkahekordistab PEG ahela pikkust ja on tugevama hüdrofiilsusega. Igas dimeerüksuses on 4 eeter- ja 2 amiidsidet, mis võivad siduda rohkem veemolekule ja moodustada tihedama hüdratatsioonikihi. Kui AEEA-AEEA kaudu on antikeha pinnaga ühendatud mitu hüdrofoobset ravimit, võib hüdratsioonikiht tõhusalt kaitsta ravimite vahelisi hüdrofoobseid koostoimeid ja takistada antikehade agregatsiooni. Eksperimentaalsed andmed näitavad, et AEEA-AEEA abil konstrueeritud ADC-d säilitavad kolloidse stabiilsuse (agregatsioonikiirus<5%) even when DAR reaches 6-8, while the control using single AEEA shows significant precipitation when DAR>4.
DAR-i reguleerimise strateegia viitab AEEA-AEEA eelnevale sidumisele ravimiga saidipõhise sidestustehnoloogia abil ja seejärel reageerimisele antikehal konstrueeritud tsüsteiiniga. Reguleerides linkerravimi ja antikeha molaarsuhet (tavaliselt 3:1 kuni 10:1), saab DAR väärtust täpselt kontrollida. Näiteks 2--kordne ülejääk võib anda DAR2 toote, 4--kordne liig võib anda DAR4 ja 8-kordne liig võib saada DAR6-8. HIC-HPLC või massispektromeetria võimaldab täpselt määrata DAR-i jaotust. Suurt koormust nõudvate kasvajanäidustuste puhul, nagu madala HER2 ekspressiooniga rinnavähk ja väikerakk-kopsuvähk, võimaldab AEEA-AEEA kõrget DAR-i ja parandab oluliselt kasvaja tapmist. Prekliinilised uuringud on näidanud, et DAR6 ADC suurendab tuumori inhibeerimise kiirust umbes 40% võrreldes DAR4 ADC-ga sama annuse korral, suurendamata oluliselt toksilisust.